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原代细胞制备与培养

来源:万物生物   发布时间:2021-11-02

原代细胞制备与培养

将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA) 或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,万物生物提原代培养服务供给您高质量的原代细胞株。原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种及培养等步骤。原代培养的方法很多,基本和最常用的是组织块培养法和分离细胞法。 

基本操作过程 

 1)、用培养液湿润所取组织材料,并用锋利的眼科剪将附在其上的脂肪和结缔组织去除干净。再用平衡液(PBS)或Hanks液漂洗;用锋利的眼科弯剪将组织块剪成小块;再用PBS或Hanks液漂洗多次,直至液体不浑浊、无油滴、清亮为止。  

2)、用湿润的吸管吸取切碎的组织块,清清吹到培养瓶皿中,并将其按一定间距均匀放在培养瓶底壁上,量不要过多,要将组织块切面贴在培养瓶底壁上;  

3)、将培养瓶翻转,使瓶底朝上,在种植了组织块一侧的对侧面加足培养液,勿使组织块与培养液接触,塞紧瓶塞; 

4)、将种植了组织块的一侧朝上,静置于37℃培养箱中;待组织块贴壁1h到3h后翻瓶,使贴壁的组织块浸没与培养液中,静置;  5)、每隔2到3天更换一次培养液,或者根据培养瓶种颜色的变化确定换液时间。

服务特点
1、原代细胞分离培养与鉴定(鉴定可提供流式细胞仪检测、免疫细胞化学、RT-PCR 、蛋白免疫印迹等多种方法检测)。
2、细胞传代代数低(一般4代),细胞状态好,无污染。
3、根据您的需要可以提供多种原代培养的细胞。
需提供的资料
1、详细说明进行原代细胞培养的组织,并确定组织是由客户提供还是本公司提供。
2、尽可能提供该原代细胞的培养条件,或者由本公司摸索培养条件。
3、对于一些常见的原代培养组织,因为保存运输的不便可能会降低原代培养的成功率,建议客户选择由本公司提供相应的组织。
提交的结果

提供冻存或处于对数生长期的细胞株一瓶(细胞培养条件,图片)。



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