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产品详情
操作说明
注意事项
产品简介
本产品ECL化学发光试剂盒是一种高灵敏度的化学发光试剂盒，基本原理是以luminol为基础的ECL化学发光。本产品能与二抗上偶联的辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）发生化学反应，产生荧光，通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备（CCD相机等）检测样品，在G2014的基础上进行了进一步优化，灵敏度更高，显色更稳定，适用于低丰度目的蛋白的检测。
本公司目前生产的ECL化学发光试剂盒有两种，分别是ECL化学发光试剂盒和超敏ECL化学发光试剂盒。对于丰度较高的目的蛋白检测，例如内参蛋白等，推荐使用，可检测含量大于等于2 ng的目的蛋白。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；4℃避光保存，有效期12个月。如果长期不用，可以-20℃保存。
使用方法
1. 配制超敏ECL工作液：将超敏ECL A液和超敏ECL B液等体积混合，注意4℃避光保存。现配现用，2天内使用。
2. Western实验中PVDF膜经二抗孵育后，多次洗涤，滤纸吸去多余液体。在曝光匣上贴两层PE手套或者其他透明薄膜，将PVDF膜的蛋白面朝上放在曝光匣两层薄膜之间，加入混合好的ECL工作溶液覆盖在膜上放置1-2 min。
3. 用滤纸或吸水纸吸去ECL工作液，盖上层薄膜开始压胶片。
4. 压完的胶片用显影、定影试剂进行显影和定影。根据发光强度调整曝光条件。
注意事项
1. 超敏ECL A液和超敏ECL B液在吸取过程中必须要更换吸头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，另外金属离子的污染会降低本试剂的灵敏度，请注意用干净吸头。使用后密封保存。
2. 如果曝光后背景很深，可能原因有二抗浓度过高，或一抗浓度过高，或者封闭液不合适，换用其他封闭液。
3. 如果荧光迅速淬灭，可能原因是目的条带荧光过强，导致HRP迅速消耗ECL。
4. 如果没有发光信号，可能是目的蛋白表达很弱，可延长压片时间。
5. 操作时请穿实验服，佩戴一次性手套
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
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