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SPC-A1 人肺腺癌细胞

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货号:
tings-1618390
产品规格:
1*10 6
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产品详情 操作说明 注意事项
细胞介绍

该细胞源自一位男性肺腺癌患者。

细胞特性

1) 来源:肺癌

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

运输和保存

可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞用途:仅供科研使用。

细胞接收后的处理:

1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。

5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。

6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议1:2传代 。

细胞培养步骤

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备DMEM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为类;

1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。

3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

1.所有细胞免费售后期为一周,一周内细胞培养出现异常及时拍照反馈。超出一周没有任何反馈视为细胞培养正常,后期若出现培养问题不再免费重发。

2. 申请售后时请提供细胞收货时及反馈售后当天细胞清晰照片及培养信息,若无清晰照片及相应信息,不予免费售后;若文件较多不方便在线联系或传送,可以向销售索要细胞情况表,填写后反馈给销售。

3. 售后仅针对由于细胞自身状态问题导致不可传代的情况,若客户收货一周内已经传代或转移细胞多次,出现死亡或者污染时不予免费售后;若客户在我方未允许的情况下,擅自遗弃细胞,视为客户自身问题导致细胞异常,不予免费售后。

4. 细胞在不同实验室培养由于所使用培养基及血清品牌、个人操作习惯、培养瓶品牌等诸多培养条件不尽相同,导致细胞培养形态、生长速度、贴壁情况均可能有所差异,对于此类细胞适应环境生长的行为,不予过度解释或免费售后。

5. 冻存细胞发货2管,客户先复苏一支,若复苏失败及时联系我方并在我方指导下复苏第二支。若客户未反馈并复苏2管失败,我方将不提供免费售后服务。冻存细胞售后均发复苏培养的,若要重发冻存细胞,需补加干冰运输费用。

6. 客户自行冻存细胞一定要注意冻存后复苏一管检查冻存活性,避免冻存死亡导致绝种。我方不对客户冻存细胞死亡负责,客户冻存细胞死亡时不予免费售后。

7. 细胞收货后,请收集发货培养基培养至少一瓶细胞,用于确定细胞培养条件及实验操作是否合适。


凡合肥万物生物科技有限公司销售的产品均有严格的质量保证。如发现产品存在包装规格疑问,请于收货之日起七日内向我公司总部或当地办事处提出,并请保证该产品,以备本公司进行核对检验。如果发现有质量问题,请于收货后一月内保留产品50%以上的量,以便本公司回收产品进行质检,确认产品质量。如逾期,则视为已经对本公司产品进行验收。 声明:如发生产品索赔事宜,本公司仅在产品价格范围内酌情赔偿,恕不接受超出产品价格范围之赔偿。客户在使用过程中有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话我们随时给予解答。

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