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产品详情
操作说明
注意事项
产品描述
种属: 人源（Homo sapiens）
组织来源: 骨（Bone）
疾病: 前列腺癌（Prostate carcinoma）
年龄: 63 岁（63 years）
性别: 男（Male）
细胞类型: 表皮细胞（Epithelial）
生长特性: 贴壁生长（Adherent）
拆包 & 存储
1. 请立即检查包装袋是否有破损或漏液
2. 请立即将细胞培养瓶从包装盒中取出，并按照下方操作步骤进行培养传代
注意：如为冻存管，请收到后立即解冻培养。若来不及解冻，请储存于液氮中（存储于负80度，会降低细胞存活率）
培养瓶中细胞操作步骤
对于贴壁培养的细胞，寄送前，我们会将运输培养基（收到后请使用完全培养基培养）充满整个培养瓶，以减少产品运输过程中贴壁细胞的脱落。
1. 收到细胞产品后，请注意观察是否有污染。将培养瓶置于倒置显微镜下仔细检查是否浑浊、是否细菌污染。因在运输过程中存在颠簸，且有些细胞对温度变化也很敏感，可能存在一些细胞脱落漂浮的情况，这些细胞仍是活细胞，请勿丢弃，可离心富集后传代使用。
2. 对于贴壁的细胞，在生物安全柜环境中，用真空泵去除培养瓶中的多余培养基，至剩余5-8mL左右，随后将细胞置于含有5%CO₂的37℃恒温 培养箱中培养，拧松瓶盖。如果细胞已经长满培养瓶请立即传代。
3. 对于悬浮的细胞，在生物安全柜环境中，转移培养瓶中的细胞至离心管中，离心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培养基吹散细胞，转移至新的培养瓶中，随后置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。
冻存管细胞操作步骤
注意：为保存细胞的高存活率，请收到产品后，立即解冻培养。
1.将冻存管置于37℃ 水浴中来回晃动，迅速解冻。为避免污染， 确保冻存管口置于水面之上。解冻需迅速，大约2分钟。
2. 一旦冻存管中液体融化后，立即取出，采用 70%酒精喷拭冻存管表面。从此步开始，后续操作须在生物安全柜中完成。
3.将冻存管中的液体转移到含有5mL完全培养基的离心管中， 离心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有冻存液的上清。
4. 用完全培养基重新悬浮细胞并转移到新的培养瓶中。为保证细胞复苏的存活率，请将培养基在37℃水浴预热后使用。
5. 将细胞置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。
贴壁细胞传代培养
1. 吸取并弃掉培养瓶中培养基，加入PBS洗涤一次。
2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37 ℃培养箱中孵育，直至细胞从壁上脱落分离。此过程大约需要3 至5分钟（此处为12.5 cm2 培养瓶所用体积，可根据实际情况增减用量）。
3. 加入2mL完全培养基中和胰蛋白酶，并轻轻吹打将细胞从培养瓶表面吹落，并使细胞分散。
4. 离心200x g/5 min，去除上清后，取适量的培养基将细胞重悬, 取适量悬液置于新的培养瓶中，并加入新鲜细胞完全培养基至总体积为4mL。
5. 将细胞置于含有5%CO₂的37℃恒温培养箱中培养。
传代比例：建议 1:2 至 1:3（以培养瓶底面积计算）
培养基换液: 每隔 2 至 3 天。
完全培养基配制
该细胞系培养所用基本培养基为 F-12K, 配置完全培养基时需加入20%FBS, 25 ng/ml cholera toxin, 10 ng/ml Epidermal Growth Factor, 0.005 mM phosphoethanolamine, 100 pg/ml
hydrocortisone, 45 nM sodium selenite, 0.005 mg/ml human recombinant insulin，1%Anti-Anti。
使用范围
本产品仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
凡合肥万物生物科技有限公司销售的产品均有严格的质量保证。如发现产品存在包装规格疑问，请于收货之日起七日内向我公司总部或当地办事处提出，并请保证该产品，以备本公司进行核对检验。如果发现有质量问题，请于收货后一月内保留产品50%以上的量，以便本公司回收产品进行质检，确认产品质量。如逾期，则视为已经对本公司产品进行验收。 声明：如发生产品索赔事宜，本公司仅在产品价格范围内酌情赔偿，恕不接受超出产品价格范围之赔偿。客户在使用过程中有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话我们随时给予解答。
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